多项选择题
下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的()
A.高纯度DNA。
B.载体与目的基因摩尔数之比为1:1。
C.载体与目的基因摩尔数之比为1:3~5。
D.连接反应体系中DNA浓度较高。
E.连接反应体系中DNA浓度较低。
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多项选择题
下列与DNA重组连接相关的说法正确的是()
A.不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
B.同聚尾法连接不仅连接效率高,也易回收插入的片段。
C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接。
D.Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
E.平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。 -
多项选择题
下列关于同聚物加尾法的说法正确的是()
A.其核心是利用末端转移酶的功能,将载体和外源DNA的3‘端再加上一端寡核苷酸。
B.不易自身环化。
C.连接效率高
D.适用于CDNA克隆
E.可能会产生某种限制酶切位点。 -
多项选择题
构建载体时,使用双酶切相对于单酶切的优点在于()
A.避免载体自身环化
B.提高连接效率
C.控制外源基因的插入方向
D.便于转化后的筛选
E.便于修改阅读框
