问答题
简答题
下面是荧光分析法定量检测维生素B2的试验步骤,其中有3处错误,请指出来并解释原因。
1、系列标准溶液的制备
取维生素B2标准溶液(10.0µg/mL) 0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL分别置于25mL的容量瓶中,各加入去离子水稀释至刻度,摇匀。得浓度依次为0.20µg/mL、0.40µg/mL、0.60µg/mL、0.80µg/mL、1.00µg/mL的一系列维生素B2标准溶液。待测。
2、激发光谱和荧光发射光谱的绘制
设置λem=540nm为发射波长,在500~1000nm范围内扫描,记录荧光发射强度和激发波长的关系曲线,便得到激发光谱。从激发光谱图上可找出其最大激发波长λex。
从得到的激发光谱中找出最大激发波长,在此激发波长下,在250-500nm范围内扫描,记录发射强度与发射波长间的函数关系,便得到荧光发射光谱。从荧光发射光谱上找出其最大荧光发射波长λem。
3、标准溶液及样品的荧光测定
固定任意一个激发波长和荧光发射波长。测量上述系列标准维生素B2溶液的荧光发射强度。数据记录于表中。以溶液的荧光发射强度为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,制作标准曲线。
在同样条件下测定未知溶液的荧光强度,并由标准曲线确定未知试样中维生素B2的浓度,计算待测样品溶液中的维生素B2的含量。
【参考答案】
1.第二步测定激发光谱的扫面范围错误,应该在近紫外和可见光范围区域,通常为250-500nm
2.测定发射光盘...
(↓↓↓ 点击下方‘点击查看答案’看完整答案 ↓↓↓)
点击查看答案
相关考题
- 问答题 用荧光分析法测定食品中维生素B2的含量:称取2.00g食品,用10.0mL氯仿萃取(萃取率100%),取上清液2.00mL,再用氯仿稀释为10.0mL。维生素B2氯仿标准溶液浓度为0.100μgmL-1。测得空白溶液、标准溶液和样品溶液的荧光强度分别为:Fo=2.0,Fs=62.0,Fx=59.0,求该食品中维生素B2的含量(μgg-1)。
- 问答题 从荧光衍生法、荧光猝灭法、荧光增强法、敏化荧光法和荧光偏振免疫分析法中选择两个分别简要说明其原理。
- 问答题 荧光强度与荧光物质浓度的关系为F=Kc。满足F=Kc公式的条件有哪些?
- 问答题 荧光分光光度计和紫外-可见分光光度计的主要区别是什么?
- 问答题 为什么荧光发射光谱和它的吸收光谱呈镜像对称关系?
- 名词解释 延时荧光
- 名词解释 激发光谱
- 名词解释 荧光量子产率
- 名词解释 荧光探针
- 判断题 对于静态猝灭,猝灭剂的存在并没有改变荧光分子激发态的寿命。
- 判断题 发生电子转移反应的熄灭剂不限于金属离子。
- 判断题 有激发光照射时,苯酚在pH=1时无荧光发射,在pH=13时有荧光发射。
- 判断题 提高共轭度有利于增加化合物的荧光量子产率并产生红移。
- 判断题 Stokes位移是指分子的荧光发射波长总比其相应的磷光发射波长要长。
- 单项选择题 Which of the following group can enhance fluorescence intensity()。
- 单项选择题 Which factor has no effect on the fluorescence quantum yield molecule()。
- 单项选择题 在分子荧光测量中,要使荧光强度正比于荧光物质的浓度,必要的条件是()。
- 单项选择题 在分子荧光分析法中,下面说法正确的是()。
- 单项选择题 分子荧光分析法比紫外-可见分光光度法的灵敏度高2~4个数量级的原因()。
- 单项选择题 下列关于室温磷光法的说法错误的是()。