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问答题

简答题

如何将一平末端的DNA片段与BamHI形成的粘末端连接?

    【参考答案】

    使用加接头连接法。人工合成一段含BamHI酶切位点的DNA短片段,然后与该平末端片段两端连起来,用BamHI切割连接片段......

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    • 多项选择题
      如果DNA分子重组时,需要用平端连接,下列哪些方法可形成平末端()。

      A.3‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
      B.3‘突出的粘末端用核酸酶切平。
      C.5‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
      D.5‘突出的粘末端用核酸酶切平。
      E.利用切口为平末端的限制酶。

    • 多项选择题
      下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的()

      A.高纯度DNA。
      B.载体与目的基因摩尔数之比为1:1。
      C.载体与目的基因摩尔数之比为1:3~5。
      D.连接反应体系中DNA浓度较高。
      E.连接反应体系中DNA浓度较低。

    • 多项选择题
      下列与DNA重组连接相关的说法正确的是()

      A.不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
      B.同聚尾法连接不仅连接效率高,也易回收插入的片段。
      C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接。
      D.Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
      E.平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。

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