问答题
简答题
如何将一平末端的DNA片段与BamHI形成的粘末端连接?
【参考答案】
使用加接头连接法。人工合成一段含BamHI酶切位点的DNA短片段,然后与该平末端片段两端连起来,用BamHI切割连接片段......
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多项选择题
如果DNA分子重组时,需要用平端连接,下列哪些方法可形成平末端()。
A.3‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
B.3‘突出的粘末端用核酸酶切平。
C.5‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
D.5‘突出的粘末端用核酸酶切平。
E.利用切口为平末端的限制酶。 -
多项选择题
下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的()
A.高纯度DNA。
B.载体与目的基因摩尔数之比为1:1。
C.载体与目的基因摩尔数之比为1:3~5。
D.连接反应体系中DNA浓度较高。
E.连接反应体系中DNA浓度较低。 -
多项选择题
下列与DNA重组连接相关的说法正确的是()
A.不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
B.同聚尾法连接不仅连接效率高,也易回收插入的片段。
C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接。
D.Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
E.平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。
